亚洲柑橘黄龙病的实时荧光PCR检测方法比较研究

作者：张子悦; 纪艺; 冉强; 魏巍; 王宇; 李亮; 蔡健^*; 陈笑芸^*

来源：农产品质量与安全, 2021, (06): 31-37.

• 柑橘
• 黄龙病
• 引物探针
• 实时荧光定量PCR
• 数字PCR

柑橘黄龙病号称柑橘的"癌症",早发现、早诊断是防止该病蔓延的重要手段。近年来发展了一系列针对该病的实时荧光PCR (real-time quantitative PCR, qPCR)检测方法,但方法间的比较研究尚无报道。本研究以感染亚洲黄龙病的柑橘叶片为材料,对6组柑橘黄龙病qPCR检测所用引物探针进行比较,包括特异性和检出限及在数字PCR (digital PCR,dPCR)中的适用性。结果显示,这6组引物探针对黄龙病的检验特异性良好;灵敏度稍有差别,依次为Las>CLIB 11=CLIB 9>CLIB 12>CLIB 4>rpll; CLIB 9在dPCR反应中相对于其他引物雨滴现象严重,因此不宜选取做后续实验。Las、CLIB 11都适用于dPCR反应,相比之下CLIB 11热图略好一些。本研究为今后黄龙病鉴定方法的选择提供了参考。

• 单位
  阜阳师范大学; 浙江省农业科学院; 中国农业科学院生物技术研究所