氟通过AKT/mTOR/ULK1信号通路对破骨细胞自噬的影响

作者：张馨怡; 刘文涛; 李利娟; 柴冰茹; 徐枭喻; 白生宾^*

来源：解放军医学院学报, 2022, 43(09): 960-965.

• 氟
• 自噬
• 破骨细胞
• AKT/mTOR/ULK1
• 信号通路

背景 氟可诱导破骨细胞分泌多种酶，使其吸收骨质的功能增强或减弱，从而溶骨或成骨，破骨细胞活化后骨吸收过程又与自噬密切相关。目的 探究氟通过AKT/mTOR/ULK1信号通路对破骨细胞自噬的影响。方法 采用RAW264.7细胞诱导形成的破骨细胞进行实验，分为对照组、NaF组、CQ组、CQ+NaF组、RAP组、RAP+NaF组，分别对相应组进行10 mg/L NaF、5 mmol/L CQ和5 mmol/L RAP给药，24 h后进行激光共聚焦显微镜检测，对破骨细胞自噬小体进行定量；荧光定量PCR检测Cathepsin K和TRAP的基因转录表达；Western blotting检测AKT/mTOR/ULKl磷酸化蛋白p-AKT、p-mTOR、p-ULK1水平，探究自噬在染氟破骨细胞的作用。结果 激光共聚焦显微镜结果显示10 mg/L氟化钠溶液能够促进自噬小体的产生，自噬小体的数量明显增多，氟化钠协同RAP激动自噬。荧光定量PCR结果显示氟化钠使Cathepsin K基因和TRAP基因的表达降低，并且氟化钠与CQ对两种基因的表达降低有协同作用，氟化钠拮抗RAP，激发自噬，抑制Cathepsin K和TRAP基因上调。Western blotting显示氟化钠能够使p-AKT和p-mTOR蛋白表达量上调，并且能协同RAP使p-AKT、p-mTOR和p-ULK1表达量增高。结论 10 mg/L氟化钠溶液促进破骨细胞自噬，抑制其骨吸收能力从而成骨，可能与AKT/mTOR/ULK1信号通路有关。

• 单位
  基础医学院; 新疆医科大学