TRIP13对B细胞淋巴瘤细胞增殖与凋亡的调控作用及机制

作者:闫肃然; 张青; 刘星辰; 原静静; 张帆; 周可树*
来源:中国实验血液学杂志, 2021, 29(05): 1485-1492.
DOI:10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2021.05.017

摘要

目的:通过在细胞系Granta-519和JVM-2敲低/过表达TRIP13来探索TRIP13对B细胞淋巴瘤细胞增殖与凋亡的调控作用及可能的分子机制。方法:使用慢病毒转染技术构建敲低/过表达TRIP13的Granta-519细胞和JVM-2细胞及其对照组细胞,荧光显微镜判断慢病毒对细胞的转染效率,实时荧光定量PCR技术和蛋白免疫印迹法评估敲低/过表达效率,CCK-8法检测细胞增殖能力,Annexin V-APC单染法检测细胞凋亡率,PI染色法检测细胞周期,蛋白免疫印迹法检测P53、MDM4和BCL-2的表达水平。结果:敲低TRIP13后Granta-519和JVM-2细胞的增殖能力显著减弱而凋亡率显著升高,过表达TRIP13后细胞的增殖能力显著增强而凋亡率显著降低。敲低TRIP13后Granta-519细胞明显阻滞于G1期,JVM-2细胞明显阻滞于G1和G2/M期。在Granta-519中敲低TRIP13后BCL-2蛋白的表达降低,MDM4蛋白的表达升高;过表达TRIP13后MDM4蛋白的表达降低。在JVM-2细胞中过表达TRIP13后BCL-2蛋白的表达升高。结论:TRIP13促进B细胞淋巴瘤细胞的增殖,抑制其凋亡,并通过参与细胞周期的调控影响增殖和凋亡。B细胞淋巴瘤细胞中TRIP13促进BCL-2蛋白的表达,抑制MDM4蛋白的表达。

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