Ghrelin在小细胞肺癌组织及H446细胞中的表达及其沉默对癌细胞凋亡的影响

作者：赵鹏; 张卉; 苏海川

来源：现代医学, 2017, 45(02): 204-210.

• Ghrelin
• 小细胞肺癌
• H446细胞
• 细胞凋亡
• microRNA-21

目的:探讨小细胞肺癌(SCLC)组织和H446细胞中生长激素释放肽(Ghrelin)的表达及Ghrelin沉默对细胞凋亡的影响及作用机制。方法:Ghrelin水平在SCLC和癌旁正常组织中以免疫组织化学法检测,在H446细胞中以RT-PCR和Western blot法检测,在细胞培养上清液中以ELISA法检测。Ghrelin以siRNA干扰法沉默,沉默效果以RT-PCR法验证;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测active-caspase-3及Bcl-2水平;RT-PCR检测miR-21水平;MTT法测定细胞活力;脂质体转染法实现miR-21过表达。结果:Ghrelin在SCLC组织中表达明显高于癌旁正常组织,在H446细胞及其培养上清中表达显著高于BEAS-2B细胞。Ghrelin沉默后,H446细胞凋亡率显著高于其他组,伴随active-caspase-3水平增高及Bcl-2水平下降,同时细胞活力下降,且miR-21水平显著低于其它组;H446细胞经GHS-R拮抗剂或抗体处理后,miR-21水平在Ghrelin基因/GHS-R共抑制细胞中达到最低,表明Ghrelin是通过识别GHS-R受体来调控miR-21水平的;此外,miR-21过表达能够逆转Ghrelin沉默诱导的细胞凋亡率增加及凋亡相关蛋白表达的变化。结论:Ghrelin在SCLC中表达显著升高,且Ghrelin沉默能够通过抑制miR-21表达促进SCLC细胞凋亡。

• 单位
  唐都医院; 第四军医大学; 泾阳县医院