单细胞转录组测序技术及其在肌内脂肪细胞研究中的应用

作者：张久盘; 马青; 王锦; 马丽娜; 魏大为; 梁小军^*

来源：中国畜牧兽医, 2023, 50(02): 479-489.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2023.02.006

• 单细胞转录组测序
• 肌内脂肪细胞
• 细胞异质性

单细胞转录组测序(single-cell RNA sequencing, scRNA-seq)技术在单细胞水平对转录组进行测序，可从表达量、细胞量及细胞组成等多种角度描述样本，主要包括单细胞分离、mRNA反转录、文库构建、转录组测序和数据分析等步骤。单细胞分离是scRNA-seq技术操作的第一步，常用的细胞分离方法有连续稀释法、显微操作法、荧光激活流式细胞术、激光捕获显微切割术和微流控技术。基于不同细胞捕获、cDNA扩增和文库构建开发了许多scRNA-seq方法，如CEL-seq2、Drop-seq、MARS-seq、SCRB-seq、Smart-seq、Smart-seq2等。与传统测序方法相比，scRNA-seq可识别单个细胞的基因表达信息、记录细胞的空间位置、跟踪不同细胞谱系在分化过程中的轨迹，这为研究难以大量提取的肌内脂肪细胞分子特异性和发生分化过程带来极大便利。作者简要介绍了scRNA-seq技术的关键步骤，比较分析了单细胞分离和转录组测序方法的优缺点，综述了肌内脂肪细胞的起源以及scRNA-seq在肌内脂肪细胞的亚群和标记基因鉴定以及细胞分化轨迹追踪中的应用，以期为肌内脂肪细胞的深入研究提供参考依据。

• 单位
  宁夏大学; 宁夏农林科学院动物科学研究所