双重RT-PCR同时快速检测H5亚型禽流感病毒和新城疫病毒强毒株

作者：张斌; 汤承; 张兆敏; 马莉; 刘小银; 李明义; 岳华

来源：中国动物检疫, 2009, 26(02): 24-28.

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2009.02.018

• 禽流感H5亚型
• 强毒力新城疫
• 双重RT-PCR
• 快速检测 Subtype H5 avian influenza virus
• velogenic Newcastle disease virus
• duplex RT-PCR
• rapid detection

本研究针对AIV H5的血凝素(HA)基因和vNDV的融合蛋白(F)基因设计两对引物,建立了单管同时检测AIVH5和vNDV的双重RT-PCR(dRT-PCR),该方法能在单一反应管内同时检测AIVH5和vNDV,不与其它亚型AIV、弱毒NDV毒株以及其它病原体发生非特异性扩增;对含有AIV H5 HA基因和vNDV F基因重组质粒DNA的最低检测限分别为20.6和406fg,敏感性与单项RT-PCR相同;从样本处理到报告结果仅需5h。对24份临床疑似样本进行检测,AIVH5均为阴性,vNDV阳性18份,PCR产物测序证明为靶基因序列,其具有vNDV F基因的特征性序列,随机选9份vNDV阳性...

• 单位
  中国医学科学院; 中国动物卫生与流行病学中心; 四川大学华西第二医院; 西南民族大学