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摘要
为获取DnaJ蛋白多克隆抗体，将截短的环形泰勒虫DnaJ蛋白C末端核酸序列构建在pET- 30a（+）质粒并转化至Rosetta（DE3）感受态细胞，经终浓度1 mmol/L IPTG 37 ℃诱导表达，蛋白可溶性分析结果显示，该重组蛋白主要以包涵体的形式存在。SDS-PAGE结果显示，纯化后的蛋白分为2条，其中一条蛋白大小约为41.65 ku，与预期结果相符，另外一条蛋白可能因为翻译提前终止比预期条带位置偏低。将纯化后的重组蛋白与弗氏佐剂混匀乳化后，皮下分点注射BALB/c小鼠，制备小鼠源DnaJ蛋白多克隆抗体。通过Western-blot验证，发现截短后的环形泰勒虫DnaJ蛋白能够与抗His单克隆抗体、环形泰勒虫阳性血清和多克隆抗体反应，表明该蛋白产物具有良好的反应原性。获得的多克隆抗体可用于研究环形泰勒虫DnaJ蛋白的功能。
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单位家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 中国农业科学院兰州兽医研究所
