干扰lncRNA H19通过调控Notch信号通路增强耐顺铂乳腺癌细胞的药物敏感性

作者：施文标; 金晓燕; 庞文洋; 王远帆; 汪正一; 张强^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(09): 1585-1591.

• 长链非编码RNA H19
• 乳腺癌
• 顺铂
• 耐药性
• Notch信号通路

目的：探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)H19对乳腺癌细胞顺铂（cisplatin/cisdiamminodichloroplatinum,DDP）耐药性的作用及其分子机制。方法：构建耐DDP人乳腺癌细胞株MCF7-Re；采用RT-qPCR检测lncRNA H19在人正常乳腺上皮细胞株MCF10A及人乳腺癌细胞株MCF7和MCF7-Re中的表达水平。构建lncRNA H19干扰质粒；采用CCK-8法检测DDP处理后MCF7-Re细胞的活力；采用TUNEL法检测细胞凋亡；Western blot检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、ATP结合盒蛋白B亚家族成员1(ATP-binding cassette protein subfamily B member 1,ABCB1)、Notch1和发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)的表达；构建Notch1过表达质粒，进行逆转实验验证lncRNA H19的作用机制。结果：lncRNA H19在MCF7-Re细胞中表达显著增加。干扰H19在DDP处理后进一步降低MCF7-Re细胞活力（P<0.01），耐药蛋白ABCB1表达显著降低（P<0.01），细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,Bcl-2蛋白表达显著减少（P<0.01）,Bax和cleaved caspase-3蛋白表达显著增加（P<0.01），并且Notch信号通路相关蛋白（Notch1和Hes1）的表达减少（P<0.01）。转染Notch1过表达质粒后，干扰lncRNA H19表达的MCF7-Re细胞活力得到一定程度的上升（P<0.01），耐药蛋白ABCB1表达显著增加（P<0.01），细胞凋亡率显著降低（P<0.01）,Bcl-2蛋白表达显著增加（P<0.01）,Bax和cleaved caspase-3蛋白表达显著减少（P<0.01）。结论：干扰lncRNA H19通过抑制Notch信号通路抑制耐DDP乳腺癌细胞的增殖，并增强该细胞对DDP的敏感性。

• 单位
  台州市立医院