表达H9N2亚型禽流感病毒流行株HA基因的重组嵌合型新城疫病毒的构建与鉴定

作者：黄庆; 乔麒龙; 王白玉; 杨盼盼; 王宝玲; 苗玉和; 赵军^*

来源：病毒学报, 2022, 38(04): 928-936.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004112

• H9N2亚型禽流感病毒
• HA蛋白
• 重组嵌合型新城疫病毒
• 基因Ⅶ型NDV

为研制同时防控基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)和H9N2亚型禽流感病毒(AIV)感染的新型高效多联疫苗，本研究将上游带有NDV HN基因非编码区(NCR)的H9N2亚型AIV流行株的血凝素基因(HA)插入到含有基因Ⅶ型NDV毒株F和HN基因的嵌合型NDV rLaSota-7F/HN全长基因组cDNA的质粒pNDFL-7F/HN中，构建含有H9N2亚型AIV流行株HA基因的重组NDV全长感染性克隆pNDFL-7F/HN-HA。将pNDFL-7F/HN-HA和辅助质粒共转染至BHK-21拯救出重组病毒rLaSota7-HA。对重组NDV进行了RT-PCR、Western Blot和IFA鉴定，以及生物学特性研究。结果表明，重组NDV rLaSota7-HA可以在鸡胚中稳定传代，且保留了LaSota株在鸡胚中高滴度复制、低致病性等生物学特性。rLaSota7-HA的鸡胚平均致死时间(MDT)为132 h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)均为0。鸡胚半数感染量(EID50)峰值达10-8.78/100μL，本研究构建的表达H9N2亚型AIV中国流行株HA基因的重组NDV rLaSota7-HA将为研制同时防控基因Ⅶ型NDV和H9N2亚型AIV感染的高效多联疫苗奠定基础。

• 单位
  河南农业大学