乙型肝炎病毒X基因siRNA对HepG2.2.15细胞的影响

作者：朱锦宏; 王春苗; 吴红; 林梅双; 朱雪莲; 吴茂锋; 吴晓蔓

来源：实用医学杂志, 2016, 32(13): 2120-2123.

• RNA干扰
• HepG2.2.15
• 乙型肝炎病毒
• 转染

目的:利用化学合成的小干扰RNA(si RNA)转染HepG2.2.15细胞,构建针对乙型肝炎病毒(HBV)X基因的细胞干扰模型,研究其在体外对HBV复制和抗原表达的抑制作用。方法 :将构建成功的HepG2.2.15细胞干扰模型,于转染后24、48、72 h,化学发光免疫法检测细胞上清液中HBsAg、HBeAg,ELISA法检测细胞上清液HBxAg蛋白表达量,荧光定量PCR检测转染后细胞中HBx mRNA相对表达量,CCK-8法检测细胞增殖能力。结果:HBx-siRNA转染HepG2.2.15细胞后,细胞增殖能力被抑制,细胞中HBx mRNA及上清液中HBxAg的表达量下降(P<0.05);并发现其能抑制细胞HBsAg、HBeAg表达,抑制高峰在72 h,抑制率分别是66%和58%;荧光定量PCR证实细胞上清液中HBV DNA的表达量下降。结论:成功地构建了HBV X基因的Hep G2.2.15细胞干扰模型,在体外具有抑制Hep G2.2.15细胞增殖和HBV基因的复制与表达的作用。

• 单位
  广东省人民医院; 广州医科大学附属第二医院; 广东省医学科学院