视黄醛脱氢酶2抑制剂对斑马鱼胚胎心脏发育的影响

作者：侯佳; 桂永浩; 王跃祥; 张立凤; 宋后燕

来源：中华围产医学杂志, 2010, (02): 117-122.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1007-9408.2010.02.009

• 维甲酸
• 视黄醛脱氢酶
• 斑马鱼
• 心脏
• 胚胎发育

目的利用新型模式生物斑马鱼,采用外源性视黄醛脱氢酶2抑制剂——对二乙氨基苯甲醛(4-diethylaminobenzaldehyde,DEAB),建立维甲酸(retinoic acid,RA)缺乏的斑马鱼模型,探讨其对斑马鱼胚胎心脏发育的影响。方法在斑马鱼胚胎受精后5、8、10.3 h,分别用1×10~(-6)、5×10~(-6)、10×10~(-6)、25×10~(-6)mol/L的DEAB处理,在解剖显微镜下实时观察胚胎发育的全过程,在受精后5 h给予1×10~(-9)mol/L外源性RA干预,观察其对DEAB致畸的拮抗作用。通过胚胎心脏表型观察、心率和心室收缩分数比较以及心脏特异分子标记——心房利钠肽A基因整体原位杂交实验分析RA缺乏对胚胎心脏发育的影响。结果外源性DEAB处理后,胚胎生存率随着处理浓度增加而降低,随着处理时间点后移而升高。当DEAB浓度≥5×10~(-6)mol/L时,斑马鱼畸胎率为100%,异常表型一致,并能被1×10~(-9)mol/L外源性RA有效援救。RA缺乏时斑马鱼心脏表现出管状心脏、无向右环化或环化不完全、房室分化异常及房室管区血液反流。与野生型胚胎相比,DEAB处理后斑马鱼胚胎心率和心室收缩分数降低,心房利钠肽A基因表达改变,在心室部位表达清晰强烈,在心房部位表达明显减弱。结论 DEAB影响胚胎发育有剂量依赖性和时效性,其致畸作用能被外源性RA有效拮抗。RA缺乏影响心脏早期发育的多个重要环节,导致心脏收缩功能受损。心脏心房利钠肽A基因表达受RA信号调控。

• 单位
  复旦大学; 复旦大学附属儿科医院