摘要

目的探讨CELF1在胶质瘤细胞增殖中的作用及可能机制。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)和Western blotting检测胶质瘤细胞系U87、U251、SHG44以及人正常星形胶质细胞系HA1800中CELF1 m RNA和蛋白表达;无义核酸NC(NC组)、si CELF1(si CELF1组)和si CELF1&siCDKN1B(si CELF1&siCDKN1B组)转染U87细胞,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期变化; Western blotting检测CELF1、CDKN1B和Cyclin D1蛋白表达。结果胶质瘤细胞系U87、U251和SHG44中CELF1 m RNA相对表达量分别为3. 1±0. 074、4. 2±0. 137和3. 6±0. 023,均高于人正常星形胶质细胞HA1800的1. 1±0. 054,差异均有统计学意义(P <0. 05)。Western blotting检测CELF1的蛋白表达与m RNA表达一致。沉默CELF1能显著降低U87细胞活力,si CELF1组G0/G1期细胞比例为(63. 5±1. 33)%,显著高于NC组的(39. 4±1. 24)%,而si CELF1组S期细胞比例为(14. 3±0. 095)%,显著低于NC组的(22. 8±1. 97)%(P<0. 05)。si CELF1组CDKN1B蛋白相对表达量为2. 37±0. 088,显著低于NC组的1. 17±0. 101(P<0. 05)。si CELF1组Cyclin D1蛋白相对表达量为0. 274±0. 039,显著低于si CELF1&siCDKN1B组的0. 83±0. 071 (P <0. 05)。si CELF1&siCDKN1B组细胞活力高于si CELF1组(P <0. 05)。si CELF1&siCDKN1B组G0/G1期细胞比例为(42. 1±1. 76)%,显著低于si CELF1组的(62. 4±1. 92)%(P <0. 05);而si CELF1&siCDKN1B组S期细胞比例为(20. 3±0. 077)%,与NC组的(22. 8±1. 97)%差异无统计学意义。结论 CELF1通过抑制CDKN1B,进而介导Cyclin D1表达促进胶质瘤细胞增殖。

  • 单位
    河南科技大学第一附属医院