利用CRISPR/Cas9构建稳定遗传的斑马鱼TYRO3纯合突变体

作者：张利文; 侯庆; 汪玲; 朱小东; 曾彩虹; 秦卫松; 刘志红^*; 陈朝红^*

来源：肾脏病与透析肾移植杂志, 2019, 28(03): 235-240.

• TYRO3受体络氨酸激酶
• CRISPR/Cas9
• 斑马鱼

目的:本研究利用CRISPR/Cas9构建稳定遗传的斑马鱼TYRO3纯合突变体,为利用斑马鱼研究TYRO3功能构建模型。方法:通过PCR和测序鉴定基因型,筛选获得TYRO3基因突变斑马鱼。通过观察斑马鱼水肿的表型以及用透射电镜观察足突融合的情况了解TYRO3突变的影响。结果:我们得到了两个移码的TYRO3突变体,每个TYRO3突变体在F2中获得2和5个纯合子,并且F0杂合子突变率可达50%。TYRO3基因突变斑马鱼出现卵黄囊、心包及眼周水肿,电镜下出现明显的足突融合。结论:本研究成功构建了TYRO3基因突变的纯合子斑马鱼,并初步证实,TYRO3突变会导致斑马鱼肾脏足细胞损伤。

• 单位
  江苏大学附属医院