AMD3100对胰腺癌细胞Panc-1生物学行为影响机制探讨

作者：王君; 马涛; 尤胜义^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2019, 26(01): 12-18.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2019.01.003

• AMD3100
• Panc-1细胞
• 增殖
• 凋亡
• 移行
• 侵袭

目的趋化轴CXCL12-CXCR4特异性的抑制剂AMD3100在近年肿瘤防治研究中越来越受到重视。本研究探讨AMD3100对胰腺癌细胞Panc-1增殖、凋亡、移行和侵袭的影响。方法 0(对照组)、1、10、100μg/mL的AMD3100作用Panc-1细胞,CCK-8检测Panc-1细胞的增殖。AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测Panc-1细胞凋亡。划痕实验和Tr-answell小室移行实验检测Panc-1细胞的移行能力。Transwell小室侵袭实验检测Panc-1细胞的侵袭能力。蛋白质印迹法技术检测Panc-1细胞中CXCL12、CXCR4、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)和血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)的表达水平。结果在增殖实验中,1、10和100μg/mL的AMD3100作用24h后,Panc-1细胞的增殖抑制率分别为(13.45±7.51)%、(15.53±7.28)%和(25.97±5.66)%,1和10μg/mL组比较,P=0.198;1和100μg/mL及10和100μg/mL比较,均P<0.001;作用48h后,Panc-1细胞的增殖抑制率分别为(16.55±12.71)%、(28.06±9.97)%和(47.43±8.52)%,组间差异有统计学意义,P<0.05。24与48h组相比差异有统计学意义,F时间=77.275,P<0.001;F浓度=62.716,P<0.001。在凋亡实验中,对照组早期凋亡细胞率平均为(5.41±0.42)%,AMD3100组为(19.31±1.27)%,P双侧<0.001;对照组总凋亡细胞率平均为(10.87±0.97)%,AMD3100组平均为(36.03±2.26)%,P双侧<0.001。在划痕实验中,对照组12、24h的移行率为(45.27±5.29)%和(77.18±5.17)%,AMD3100组为(19.09±5.51)%和(43.92±6.57)%,各组间差异有统计学意义,F时间点=150.090,F浓度=165.552,均P<0.001。Transwell小室移行系统中0、1、10和100μg/mL的AMD3100作用Panc-1细胞24h的穿膜细胞数平均为(361±34)、(264±34)、(238±13)和(185±11)个,F=51.145,P<0.001。在Transwell小室侵袭系统中,0、1、10和100μg/mL的AMD3100作用Panc-1细胞24h后穿膜细胞数平均为(359±20)、(265±19)、(197±19)和(122±18)个,F=45.963,P<0.001。经蛋白质印迹法技术检测,AMD3100可显著降低Panc-1细胞中MMP-9(F=141.022,P<0.001)和VEGF-C(F=197.564,P<0.001)的表达水平,且随着AMD3100浓度的增高,抑制效果越显著;AMD3100对CXCL12、CXCR4的表达基本没有影响,AMD3100浓度增加,CXCL12(F=0.795,P=0.511)和CXCR4(F=2.363,P=0.102)表达差异无统计学意义。结论AMD3100可能通过影响CXCL12与CXCR4的结合,下调MMP-9和VEGF-C的表达,从而抑制Panc-1增殖、移行和侵袭的能力,诱导其细胞凋亡。

• 单位
  天津市北辰医院; 天津医科大学总医院