RNA干扰白细胞抗原-G增强自然杀伤细胞对肝癌的免疫监视

作者：曾宪成; 张彤; 李华; 方天翎; 聂常富; 蔡常洁; 杨扬; 陆敏强; 陈规划

来源：中华实验外科杂志, 2009, 26(8): 991-994.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2009.08.013

• 癌
• 肝细胞
• 人类白细胞抗原G
• RNA干扰

目的 构建表达人类白细胞抗原-G(HLA-G)基因shRNA载体,探讨其对自然杀伤细胞(NK)细胞杀伤效应的影响.方法 构建4个HLA-G-shRNA真核表达质粒,转染至Huh7细胞.检测HLA-G mRNA及蛋白质水平的表达.将NK-92MI细胞与靶细胞共同培养,以LDH释放法观察不同效靶比时NK-92MI细胞对靶细胞的杀伤效应.结果 经酶切及测序鉴定证实,插入序列与设计的序列相符.Real Time-PCR和Western-blot结果均表明重组载体抑制了Huh7细胞HLA-G基因的表达.NK-92MI细胞对转染HLA-G的shRNA的Huh7细胞杀伤作用明显升高(P<0.01).封闭NK-92MI细胞ILT2受体后,杀伤作用降低(P<0.01).结论 HLA-G shRNA可以增强NK细胞对肝癌细胞的杀伤效应.

• 单位
  中山大学; 中山大学附属第三医院