NF-κB通过Slc1a2调控树突状细胞成熟及功能的研究

作者：包静; 责祎旦·加帕尔; 蔡珊珊; 刘俐彤; 曹文芝^*; 李金耀^*

来源：国际生物医学工程杂志, 2022, 45(05).

• 核因子-κB
• 溶质载体家族1成员2
• 树突状细胞

目的研究核因子-κB(NF-κB)通过溶质载体家族1成员2(Slc1a2)对树突状细胞(DC)成熟及功能的调控作用。方法采用Slc1a2特异性的siRNA以及过表达Slc1a2真核表达载体转染小鼠骨髓来源的DC, 实时荧光定量RT-PCR和Western Blot检测敲降及过表达效率, 采用流式细胞术检测DC表面分子CD40、CD80及主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的表达和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞因子白细胞介素(IL)-12、IL-6和转化生长因子-β(TGF-β)的分泌考察敲降Slc1a2对DC成熟和功能的影响, 并考察过表达Slc1a2对DC成熟和功能的影响以及采用混合淋巴细胞培养检测Slc1a2对T细胞增殖能力的影响及ELISA检测IL-17A的分泌水平, 通过流式细胞术分析DC的FITC相对荧光强度变化考察过表达Slc1a2对抗原吞噬的能力, 最后采用NF-κB抑制剂甲苯酰苯丙氨酸氯甲基酮(TPCK)预处理DC, 考察TPCK对DC内Slc1a2的表达及DC成熟的影响。结果脂多糖刺激成熟的DC中Slc1a2高表达(P<0.001)。在DC中敲降Slc1a2降低了DC成熟及刺激CD4+ T细胞增殖的能力(P<0.001), 抑制了IL-17的分泌(P<0.01)。过表达Slc1a2增强了DC成熟及刺激CD4+ T细胞增殖的能力, 促进IL-17A的分泌(均P<0.01)。NF-κB抑制剂TPCK预处理DC抑制了脂多糖诱导的Slc1a2在mRNA和蛋白水平的表达。结论 NF-κB调控了DC内Slc1a2的表达, 其表达水平影响了DC的成熟及功能。

• 单位
  新疆师范大学; 生命科学学院