禽流感DNA疫苗重组质粒组织分布的实时荧光定量PCR方法建立

作者：熊杰; 彭广能; 王国俊; 李俊平; 姜永萍; 陈化兰

来源：中国预防兽医学报, 2011, (03): 203-207.

• 禽流感
• DNA疫苗
• 组织分布
• 实时荧光定量PCR avian influenza
• DNA vaccine
• biodistribution
• real-time PCR

为研究禽流感病毒(AIV)DNA疫苗重组质粒在组织中的分布情况,本研究以AIV DNA疫苗pCAGGoptiHA 5HA基因为检测对象,分别建立检测AIV DNA疫苗重组质粒的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法和TaqMan MGB实时定量PCR方法。经优化比较两种方法的特异性、敏感性、重复性和污染率。结果表明,两种方法的标准曲线线性关系均较好,相关系数均达到0.999;最低检测量为42 copies,特异性强;探针法的重复性优于染料法,污染率低于染料法,因此采用TaqMan MGB实时定量PCR方法检测AIV DNA疫苗重组质粒组织分布情况。

• 单位
  四川农业大学; 农业部; 兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所