小鼠骨髓巨噬细胞体外培养及增殖情况的探索

作者：祝文; 崔凤; 程志坚^*; 贺西京

来源：重庆医学, 2019, 48(17): 2909-2912.

DOI：10.3969/j.issn.1671-8348.2019.17.007

• 巨噬细胞
• 细胞培养技术
• 细胞增殖

目的建立小鼠骨髓来源巨噬细胞的体外培养方法及其标志物表达、增殖情况,为相关研究提供理论基础。方法从6～8周龄昆明小鼠股骨分离得到骨髓单细胞悬液,在含15%L929上清液的培养液中培养。在1、3、5、7d不同时间点,利用免疫荧光染色检测其巨噬细胞标志物F4/80表达情况,同时利用Edu标记法检测细胞增殖情况。结果用含L929上清液的培养液诱导培养骨髓细胞1、3、5、7d后细胞F4/80阳性细胞率分别为(1.52±0.39)%、(17.95±2.36)%、(75.57±6.17)%、(95.49±9.83)%,随着培养时间延长,F4/80阳性细胞率逐渐升高,培养骨髓细胞7d后吞噬能力明显,不同培养时间点F4/80阳性细胞率比较差异均有统计学意义(1dvs.3d、3dvs.5d、5dvs.7d,P<0.05)。随着培养时间延长Edu阳性细胞逐渐增高,培养1、3、5、7d后细胞EdU阳性细胞率分别为(2.13±0.33)%、(4.61±0.54)%、(18.02±2.19)%、(28.84±3.27)%,不同培养时间点EdU阳性细胞率比较,差异均有统计学意义(1dvs.3d、3dvs.5d、5dvs.7d,P<0.05)。结论体外培养可成功获得小鼠骨髓来源巨噬细胞,培养7d是获得高纯度巨噬细胞的重要条件。

• 单位
  西安交通大学医学院第二附属医院; 陕西省咸阳市第一人民医院