荧光分光光度计液相快速观测发夹探针与katG基因463突变密码子的杂交荧光

作者：陈庆海; 黄君富; 张波; 华兴; 匡红; 杨新; 府伟灵

来源：中华医院感染学杂志, 2010, 20(11): 1524-1526.

• 发夹DNA探针
• 耐异烟肼katG基因
• 463密码子点突变
• 荧光分光光度计

目的针对结核分枝杆菌耐异烟肼katG基因463密码子设计发夹DNA探针,尝试运用荧光分光光度计直接观测液相中发夹DNA探针与katG基因463密码子扩增产物杂交后的荧光信号,从而检出该位点突变。方法运用软件Beacon designer设计katG基因包含463密码子的发夹DNA探针,应用荧光分光光度计检测扩增片段与探针杂交后荧光信号,同时对扩增产物测序并作比较。结果通过荧光分光光度计观测到结核标准株及耐异烟肼katG基因463密码子PCR产物与发夹DNA探针杂交后荧光信号差异有统计学意义;16株耐异烟肼组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,耐异烟肼组katG基因463密码子突变检出率为34%,测序法突变检出率为37%。结论应用荧光分光光度计直接观测发夹DNA探针液相杂交荧光具简单、灵敏等优特点;katG基因463密码子突变是结核分枝杆菌耐异烟肼的主要原因之一。

• 单位
  解放军第452医院; 第三军医大学第一附属医院