内切葡聚糖酶基因ce17b在里氏木霉中的同源表达

作者：顾斌涛; 黄国昌; 熊大维

来源：中国酿造, 2016, 35(8): 129-132.

DOI：10.11882/j.issn.0254-5071.2016.08.029

• 内切葡聚糖酶
• 里氏木霉
• 纤维素酶
• 同源表达

用里氏木霉(Trichoderma reesei)作为宿主同源表达内切葡聚糖酶基因.运用聚合酶链反应(PCR)技术从里氏木霉cDNA中扩增得到内切葡聚糖酶基因ce17b序列,并将其连接到载体p18-m2上构建重组质粒,将重组质粒转化到里氏木霉菌株中,通过筛选获得表达内切葡聚糖酶的重组里氏木霉工程菌.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测显示,发酵液中重组内切葡聚糖酶的分子质量约48 ku.摇瓶发酵结果显示,内切葡聚糖酶在重组里氏木霉中得到分泌表达,发酵液中的内切葡聚糖酶和滤纸酶活分别达到了726 U/mL和28.7 U/mL,分别为出发菌株酶活的2.9倍和1.1倍.玉米芯进行糖化试验结果显示,重组里氏木霉所产酶液糖化玉米芯的酶解得率为81.4％,比出发菌株提高了6.3％.

• 单位
  江西省科学院微生物研究所