鸦胆子苦醇通过CC趋化因子配体2-C-C趋化因子受体2信号通路对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响

作者：李浩; 戎帅; 刘连涛; 李克伟^*

来源：中国中医骨伤科杂志, 2023, 31(12): 1-14.

DOI：10.20085/j.cnki.issn1005-0205.231201

• 鸦胆子苦醇
• 骨肉瘤
• 增殖
• 凋亡
• 免疫逃逸
• CC趋化因子配体2-C-C趋化因子受体2信号通路

目的:探讨鸦胆子苦醇(BRU)调节CC趋化因子配体2(CCL2)-C-C趋化因子受体2(CCR2)信号通路对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:将骨肉瘤细胞系MG-63分为MG-63组(未处理的MG-63细胞)、L-BRU组(25 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞)、M-BRU组(50 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞)、H-BRU组(75 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞)、GW0742组(1μmol/L CCL2-CCR2信号通路激活剂GW0742处理MG-63细胞)、H-BRU+GW0742组(1μmol/L GW0742和75 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞),MTT法检测鸦胆子苦醇对正常人成骨细胞系hFOB1.19细胞的毒性，CCK8法检测MG-63细胞增殖，流式细胞仪检测MG-63细胞、CD8+T细胞凋亡，ELISA法检测外周血单个核细胞(PBMC)上清液IFN-γ、TNF-α水平，Western Blot法检测CCL2-CCR2通路蛋白以及凋亡相关蛋白水平。结果:0～500 nmol/L鸦胆子苦醇对hFOB1.19细胞无明显毒性影响；与MG-63组相比，L-BRU组、M-BRU组、H-BRU组光密度(OD)值，Bcl-2、CCL2、CCR2、PD-L1蛋白水平及CD8+T细胞的凋亡率均显著降低(P<0.05),凋亡率，IFN-γ、TNF-α水平及Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白水平均显著升高(P<0.05),而GW0742组以上指标趋势相反；与H-BRU组相比，H-BRU+GW0742组光密度值，Bcl-2、CCL2、CCR2、PD-L1蛋白水平及CD8+T细胞的凋亡率均显著增加(P<0.05),凋亡率，IFN-γ、TNF-α水平及Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白水平均显著降低(P<0.05)。结论:鸦胆子苦醇可能通过抑制CCL2-CCR2信号通路对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和免疫逃逸产生影响。

• 单位
  石家庄市第三医院