MCU通过LETM1维持线粒体钙稳态调节口腔鳞状细胞癌细胞转移

作者：武燃; 刘辉; 郑深; 左伟文; 毕磊; 陈晖^*; 张春光; 许晓亮

来源：重庆医科大学学报, 2023, 48(04): 411-416.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.003205

• 口腔鳞状细胞癌
• 线粒体钙单向传递体
• 侵袭
• 迁移
• 上皮-间充质转化

目的：探讨线粒体钙离子单向转运蛋白（mitochondrial calcium uniporter,MCU）与亮氨酸拉链/EF跨膜蛋白-1(leucine zipper/EF hand-containing transmembrane-1,LETM1)在调控线粒体钙稳态机制中的作用以及对口腔鳞状细胞癌细胞转移的影响。方法：选用口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞株作为研究对象，构建MCU慢病毒干扰载体和过表达质粒，合成LETM1 siRNA干扰序列。采用细胞划痕实验、Transwell细胞侵袭实验检测MCU表达水平对CAL-27细胞侵袭、迁移的影响；细胞内钙离子荧光探针（Fluo-4 AM）以及JC-1线粒体膜电位测定实验检测MCU表达水平对CAL-27细胞内钙离子浓度及线粒体膜电位的影响；免疫荧光和Western blot检测CAL-27细胞内MCU、LETM1以及上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白表达水平。结果：MCU过表达促进CAL-27细胞迁移和侵袭，MCU沉默组及MCU过表达联合LETM1 siRNA组细胞迁移和侵袭能力均明显受到抑制（F=45.302、1 300.246；均P>0.05）;MCU过表达组细胞内钙荧光强度和线粒体膜电位明显上调，MCU沉默组和MCU过表达联合LETM1 siRNA组细胞内钙荧光强度和线粒体膜电位水平均明显降低（F=75.585、141.767；均P<0.01）;MCU过表达组MCU、LETM1、N-cadherin以及Vimentin蛋白表达水平明显升高，而E-cadherin蛋白表达水平明显降低；MCU沉默组MCU、LETM1、N-cadherin及Vimentin蛋白表达水平较其他处理组明显降低，而E-cadherin蛋白表达水平明显升高（均P<0.01）。结论：MCU可调控LETM1及EMT标志物的表达，干扰LETM1可阻断MCU上调线粒体钙离子浓度和线粒体膜电位水平，降低口腔鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移能力。

• 单位
  唐山市第二医院; 唐山职业技术学院; 华北理工大学