藏药波棱瓜子总木脂素对ANIT诱导的小鼠肝损伤的保护作用及机制研究

作者：李娜芝; 师艺玮; 郭敏侠; 朱继孝^*; 梁健^*; 冯育林

来源：中药新药与临床药理, 2023, 34(01): 49-56.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2023.01.007

• 波棱瓜子
• 总木脂素
• α-萘异硫氰酸酯(ANIT)
• 胆汁淤积
• 肝损伤
• 炎症
• 作用机制
• 氧化应激
• 小鼠

目的 探讨波棱瓜子总木脂素(TLHPS)对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的小鼠肝内胆汁淤积(intrahepatic cholestasis,IC)型肝损伤的保护作用及其作用机制。方法 将70只小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组、TLHPS各剂量组，各组连续给药7 d，在第5天给药2 h后，除正常组灌胃橄榄油溶液外，其余各组小鼠给予ANIT溶液造模。之后按照原剂量继续给药，造模48 h后，对各组小鼠进行摘眼球采血，并摘取肝脏。检测各组小鼠血清中肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、直接胆红素(DBIL)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)；炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)及肝脏抗氧化应激因子谷胱甘肽(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)；采用HE染色检测肝脏病理变化；Western Blot法检测小鼠肝组织中NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组肝脏受损情况严重，ALT、AST、ALP酶活力明显升高(P<0.01),DBIL、TBIL、TBA、MDA、TNF-α、MCP-1含量明显升高(P<0.01),CAT、GSH-PX、SOD酶活性明显降低(P<0.01),NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较，联苯双酯组及TLHPS各给药组ALT、AST、ALP酶活力明显降低(P<0.01),DBIL、TBIL、TBA、MDA、TNF-α、MCP-1含量明显降低(P<0.01),CAT、GSH-PX、SOD酶活性明显升高(P<0.05,P<0.01),NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。与联苯双酯组比较，TLHPS(0.4 g·kg-1)组ALT、AST、ALP、TBA、TBIL、DBIL含量明显升高(P<0.05,P<0.01),TLHPS各给药组SOD含量明显降低(P<0.01),TLHPS(0.05 g·kg-1)给药组JNK、p38、IL-1β蛋白表达水平明显上调(P<0.05,P<0.01),TLHPS(0.4、0.2、0.1 g·kg-1)给药组NF-κB蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)，其余各组差异均无统计学意义。病理切片显示TLHPS能改善肝脏受损情况。结论 TLHPS对IC型肝损伤存在保护作用，其作用机制可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB、NLRP3及JNK/p38MAPK通路，从而抑制炎症反应及改善小鼠肝脏氧化应激损伤有关。

• 单位
  江西中医药大学; 中药资源与民族药研究中心