当归多糖改善大鼠心肌缺血再灌注损伤的体内外观察及其机制探讨

作者：叶建华; 沈盛晖; 张田杰; 冯频频

来源：山东医药, 2023, 63(29): 45-50.

• 当归多糖
• TLR4/NF-κB信号通路
• 炎症反应
• 细胞凋亡
• 心肌缺血再灌注损伤

目的 建立大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的体内、体外模型，观察当归多糖（ASP）对大鼠MIRI的改善作用并探讨其机制。方法 在体内研究，成年SD大鼠随机分为假手术组、MIRI组、ASP低剂量组、ASP高剂量组，除假手术组外，均采用冠状动脉左前降支结扎再灌注的方法建立MIRI模型，ASP低、高剂量组在建模后分别给予50、100 mg/kg的ASP灌胃，假手术组及MIRI组给予等量生理盐水灌胃，持续4周；采用ELISA法检测各组血清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）及炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β;Western blotting法检测各组心肌组织凋亡蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白（Bax）、裂解的半胱胺酸蛋白酶（cleaved Caspase-3）及toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白TLR4、磷酸化核蛋白（p-p65）、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(p-IκBα)表达。在体外研究，将大鼠心肌细胞分为对照组、H/R组、H/R+ASP低剂量组、H/R+ASP高剂量组，对照组正常培养不做处理，其他3组均建立体外心肌细胞缺氧复氧（H/R）模型，建模后H/R+ASP低、高剂量组分别加入浓度为5、10μg/mL的ASP,H/R组不做处理；采用MTT比色法检测各组心肌细胞活性，ELISA法检测各组心肌细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β,Western blotting法检测各组心肌细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3及TLR4/NF-κB通路蛋白TLR4、p-p65、p-IκBα表达。结果 在体内研究，血清心肌损伤标志物LDH、CK-MB水平及血清炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平MIRI组>ASP低剂量组>ASP高剂量组>假手术组（P均<0.05）；心肌组织Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达MIRI组>ASP低剂量组>ASP高剂量组>假手术组，心肌组织Bcl-2蛋白表达假手术组>ASP高剂量组>ASP低剂量组>MIRI组（P均<0.05）；心肌组织TLR4/NF-κB通路相关蛋白TLR4、p-p65、p-IκBα表达MIRI组>ASP低剂量组>ASP高剂量组>假手术组（P均<0.05）。在体外研究，心肌细胞活性对照组>H/R+ASP高剂量组>H/R+ASP低剂量组>H/R组（P均<0.05）；心肌细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平H/R组>H/R+ASP低剂量组>H/R+ASP高剂量组>对照组（P均<0.05）；心肌细胞Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达H/R组>H/R+ASP低剂量组>H/R+ASP高剂量组>对照组，心肌细胞Bcl-2蛋白表达对照组>H/R+ASP高剂量组>H/R+ASP低剂量组>H/R组（P均<0.05）；心肌细胞TLR4/NF-κB通路相关蛋白TLR4、p-p65、p-IκBα表达H/R组>H/R+ASP低剂量组>H/R+ASP高剂量组>对照组（P均<0.05）。结论 ASP在体内、体外缺血再灌注模型中均可改善大鼠MIRI，其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路激活、减轻炎症反应、减少细胞凋亡有关。

• 单位
  浙江省立同德医院