摘要
目的:探究Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)对喉鳞状细胞癌(Laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞HEp2增殖、细胞周期、凋亡及迁移侵袭的调控机制。方法:运用脂质体法将si-con组(转染si-con)、si-RUNX1组(转染si-RUNX1)转染至HEp2细胞;实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(Real time fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-q PCR)、蛋白免疫印迹(Western blotting,WB)实验、细胞计数试剂盒(Cell counting Kit8,CCK8)法、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)法、流式细胞术、划痕实验、迁移侵袭(Transwel) l实验检测细胞中RUNX1的mRNA和蛋白表达,细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期依赖性蛋白激酶(Cyclin D-cyclin-dependent kinase,CDK4)、裂解的半胱氨酸蛋白酶(Cleaved caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)和磷酸化(Phosphorylation,p)-AKT的蛋白表达。结果:与si-con组相比,si-RUNX1组细胞RUNX1的mRNA和蛋白表达均显著降低,细胞增殖情况显著降低,细胞周期S期阻滞,细胞凋亡率显著升高,划痕愈合率和迁移侵袭细胞量均显著降低(P<0.05)。重要的是,干预RUNX1还抑制PI3K/AKT信号通路关键因子PI3K、p-AKT和p-AKT/AKT的蛋白表达。结论:干预RUNX1不利于HEp2细胞的存活及迁移侵袭,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路的活性有关。
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单位河北工程大学附属医院