斯氏艾美耳球虫泛素结合酶重组蛋白对家兔免疫保护效果的评价

作者：白鑫; 肖洁; 郑若愚; 陈浩; 蒲家艳; 郝哥; 熊常明; 何维; 任永军^*; 杨光友^*

来源：中国兽医科学, 2023, 53(05): 621-630.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0098

• 家兔
• 斯氏艾美耳球虫
• 泛素结合酶(UCE)
• 重组蛋白
• 免疫保护

观察斯氏艾美耳球虫（Eimeria stiedai）重组蛋白r Es-UCE、r Es-EFG和r Es-DG32对家兔的免疫保护效果。利用相对荧光定量PCR分析Es-UCE、Es-EFG和Es-DG32 3个基因在虫体不同发育时期的转录水平并进行原核表达与蛋白纯化。在进行了3个重组蛋白对家兔的免疫保护效果初步试验后，筛选出r Es-UCE进行进一步评价，将42只45日龄无球虫家兔分为空白对照组、攻虫对照组、空载蛋白对照组、佐剂对照组和r Es-UCE免疫组，各组分别颈部皮下注射1 m L无菌PBS,1 m L无菌PBS,1 m L(2 mg/m L)皂素，1 m L(100μg/m L)Trx-His-S tag蛋白，1 m L(100μg/m L)r Es-UCE,14 d后同等剂量进行二免。二免后第14天攻虫，除空白对照组外每只无球虫兔经口感染1×104个斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊。感染后定期观察各组兔的临床症状、称重并采血，感染后第21天剖检并收集直肠粪样，测定并统计各组兔的死亡率、卵囊排出量、相对增重率、料肉比、肝指数、血清种特异性抗体与细胞因子等。结果显示，试验各组均未出现死亡，r Es-UCE免疫组平均相对增重显著大于攻虫对照组（P<0.05），肝指数显著低于攻虫对照组（P<0.05）。r Es-UCE免疫组相对增重率达90.69%，卵囊减少率达78.81%，细胞因子（IL-2、IL-10、IL-17和IFN-γ）水平和特异性抗体水平均与对照组存在显著差异（P<0.05）。结果表明，r Es-UCE可作为斯氏艾美耳球虫重组亚单位疫苗的候选抗原。

• 单位
  四川省畜牧科学研究院; 四川农业大学