基于AMPK/SIRT1通路探讨延胡索乙素对非酒精性脂肪性肝病体外模型脂质毒性的治疗作用

作者：郭向宇; 姚池; 尹逊哲; 张佳馨; 李畅; 刘作家; 郭焱^*

来源：中药材, 2023, 46(02): 447-453.

DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2023.02.031

• 延胡索乙素
• 非酒精性脂肪性肝病
• 脂质毒性
• 凋亡
• AMPK/SIRT1

目的：探讨延胡索乙素对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)体外模型脂质毒性的治疗作用。方法：采用油酸(sodium oleate, OA)∶棕榈酸(sodium palmitate, PA)=2∶1的PO联合诱导人肝癌细胞BEL-7402建立NAFLD体外脂质毒性模型并给予延胡索乙素进行干预。将细胞分为正常对照组、模型组、延胡索乙素组(75、100μmol/L)。采用油红O染色法观察细胞内脂滴；CCK-8实验检测细胞活力；试剂盒检测LDH释放量；酶标法检测细胞内TC、TG含量；Hoechst 33342染色检测细胞凋亡；RT-qPCR检测FASN、IL-1、IL-6 mRNA表达；Western Blot检测p-AMPK、AMPK、SIRT1、FAS、HIF-1α、p-JNK、JNK、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果：选用PO(800∶400μmol/L)诱导BEL-7402细胞建立NAFLD体外脂质毒性模型。与正常对照组比较，模型组BEL-7402细胞脂质沉积、凋亡水平、LDH、TC、TG显著升高，细胞活力显著降低，FASN、IL-1、IL-6 mRNA表达显著升高，SIRT1、Bcl-2蛋白表达及p-AMPK/AMPK水平显著降低，FAS、HIF-1α、Bax、Caspase-3蛋白表达及p-JNK/JNK水平显著升高(P<0.05～P<0.001)。与模型组比较，延胡索乙素组细胞脂质沉积、凋亡、LDH、TC、TG显著降低，细胞活力显著升高，FASN、IL-1、IL-6 mRNA表达显著降低，SIRT1、Bcl-2蛋白表达及p-AMPK/AMPK水平显著升高，FAS、HIF-1α、Bax、Caspase-3蛋白表达及p-JNK/JNK水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论：延胡索乙素可能是通过激活AMPK/SIRT1通路，降低脂质沉积和脂质毒性，进而减轻脂质毒性引起的肝细胞凋亡。

• 单位
  中国科学院长春应用化学研究所; 电分析化学国家重点实验室; 长春中医药大学; 吉林省产品质量监督检验院