siRNA对宫颈癌细胞系HPV16 E6基因的作用

作者：白丽霞; 赵超; 李小平; 王建六; 魏丽惠

来源：中国妇产科临床杂志, 2005, (04): 284-288.

DOI：10.13390/j.issn.1672-1861.2005.04.015

• 小干扰RNA
• 宫颈癌
• 人乳头状瘤病毒

目的构建并筛选出最有效的HPV16E6基因特异的小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)表达载体,观察其对宫颈癌细胞中HPV16E6基因表达的长期影响,探讨E6基因在宫颈癌发生过程中的分子作用机制,为临床HPV感染及宫颈癌治疗探索新方法。方法构建HairpinsiRNA质粒,稳定转染宫颈癌SiHa细胞,鉴定转染细胞中的质粒DNA,通过Real-TimeRT-PCR检测细胞中HPV16E6mRNA表达,采用Western-blot检测p53、p21等蛋白的变化。MTT法(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法)检测SiHa细胞转染siRNA后细胞增殖曲线。结果HPV16E6AhairpinsiRNA表达载体转染人宫颈癌SiHa细胞,可以在细胞内长期表达siRNA,有效抑制细胞内HPV16E6基因的表达。E6AsiRNA能抑制细胞生长,作用持续达4个月以上。结论利用siRNA表达载体抑制整合在细胞中的外源HPVE6病毒癌基因可能是治疗HPV感染和宫颈癌的一种新的理想方法。

• 单位
  北京大学人民医院