鸭坦布苏病毒Capsid蛋白的亚细胞定位及其功能分析

作者：成玉婷; 焦琳琳; 吴庆国; 朱善元^*

来源：中国动物传染病学报, 2023, 1-11.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20230614.002

• 鸭坦布苏病毒
• 衣壳蛋白
• 细胞适应性
• 亚细胞定位

为探讨鸭坦布苏病毒(DTMUV)201909株在不同细胞中的适应性，本研究以DTMUV-201909株感染四种不同细胞系(DEF、DF-1、BHK21和Vero)，并用TCID50、RT-PCR和IFA方法分析DTMUV增殖情况。结果显示，DTMUV在DEF和DF-1细胞中复制能力较BHK21和Vero细胞强。此外，利用一步克隆技术获得DTMUV Capsid重组真核表达载体并瞬时转染至DEF细胞。PCR克隆获得目的基因DTMUV Capsid片段大小为360 bp，Western blot显示重组质粒在细胞内表达的融合蛋白分子质量大约为16 ku，IFA观察到DTMUV Capsid在细胞质和细胞核中均有分布。将DTMUV Capsid质粒转染至DEF细胞，发现IFN-α、IFN-β和IFN-γ表达分别升高3.78、2.31和1.82倍，MAVS、TLR3和RIG-I表达分别降低49.5%、62.3%和73.1%。本研究为进一步阐明DTMUV的分子致病机理奠定基础，也为深入研究DTMUV Capsid蛋白的结构与功能提供了材料。

• 单位
  南京农业大学; 江苏农牧科技职业学院; 江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室