蜜蜂蜂房蜜蜂球菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

作者：何晓杰; 张体银; 季新成; 王科珂; 叶尔保勒; 阿斯喀; 哈森; 史秀丽; 王振宝

来源：中国预防兽医学报, 2017, 39(08): 645-648.

• 欧洲幼虫腐臭病
• 蜂房蜜蜂球菌
• TaqMan荧光定量PCR

为建立快速检测蜜蜂欧洲幼虫腐臭病（EFIB）病原菌蜂房蜜蜂球菌（M.pluton）的方法,本研究根据M.pluton 16S rRNA基因序列,设计并合成特异性引物和TaqMan探针,经反应参数优化,建立了检测M.pluton TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,该方法与其它蜜蜂常见病病原均无交叉反应;该方法的灵敏度为1.0×101拷贝/μL的阳性质粒,比普通PCR灵敏1 000倍;重复性试验表明该方法的批内和批间变异系数均小于1%。应用该方法对100份实验室模拟样品和150份临床样品进行了检测,与预期结果一致。本研究建立的方法可为蜂及蜂产品中M.pluton的检验检疫提供新的、有效的技术手段。

• 单位
  伊犁职业技术学院; 新疆出入境检验检疫局; 福建出入境检验检疫局; 伊犁出入境检验检疫局