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摘要
目的:探讨黄芪多糖(APS)对结肠炎相关癌(CAC)小鼠和结肠癌细胞中肠道细菌诱导的Toll样受体-4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路的影响。方法:将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组(n=10),模型组(n=15)和APS组(n=15)。模型组和APS组由氧化偶氮甲烷和葡聚糖硫酸钠制成CAC模型。对照组和模型组给予0.9%氯化钠注射液,APS组给予100 mg/kg APS灌胃14 d。动物研究中,通过HE染色方法检测小鼠中结肠直肠的病理状况;通过16S rDNA测序分析肠道菌群的特征;通过酶联免疫吸附试验测定脂多糖浓度;免疫组化法检测结肠组织中TLR4和NF-κBp65蛋白的表达。体外研究中,进一步验证了APS对人结肠癌细胞增殖和迁移的影响,运用MTT测定和划痕实验用于评估细胞活力测定;通过免疫荧光检测NF-κBp65的核转位;Western blot检测E-cadherin和N-cadherin蛋白的表达。结果:测序结果表明,模型组以革兰氏阴性菌拟杆菌属为主,APS组肠道菌群多为革兰氏阳性菌乳球菌属和双歧杆菌属;APS组LPS、TLR4和NF-κBp65蛋白的表达水平明显低于模型组;APS可以抑制LoVo细胞和HCT116细胞的增殖和迁移能力;APS(40μg/mL)可抑制NF-κB的核转位,降低N-cadherin蛋白的表达,增加E-cadherin蛋白的表达。结论:APS通过抑制革兰氏阴性病原体,减少LPS的释放,抑制TLR4/NF-κB信号通路,阻止CAC的发生,且APS可有效抑制人结肠癌细胞的EMT过程,有效控制肿瘤的增殖和迁移。
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