苏云金芽孢杆菌Cry2Aa蛋白的体外表达及纯化

作者：高洁荣; 何颖; 邹泽红; 艾云灿

来源：湖北农业科学, 2013, (03): 702-705.

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2013.03.048

• 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)
• Cry2Aa蛋白
• 表达
• 纯化 Bacillus thuringiensis
• Cry2Aa protein
• expression
• purify

根据大肠杆菌密码子偏好性对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)cry2Aa基因进行优化,并合成全长基因,将cry2Aa基因克隆到表达载体pET-44a上,转化到大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达,优化表达条件,采用亲和层析和SDS-PAGE胶回收纯化,Western blot鉴定回收产物。结果表明,IPTG浓度为0.50 mmol/L、27℃诱导4 h时Cry2Aa蛋白表达量最高,SDS-PAGE胶回收Cry2Aa纯化蛋白所得的产量高于亲和层析法。

• 单位
  呼吸疾病国家重点实验室; 中山大学; 广州医科大学