摘要
为了探究更加高效的体胚发生与植株再生的关键因子,基于本实验室前期的研究,以月季(Rosa chinensis cv. ‘Old Blush’)的叶柄与叶片为外植体,在不同条件下进行月季胚性愈伤和月季体细胞胚胎发生与体细胞胚胎植株再生的研究。结果发现,在胚胎增殖培养基(embryo proliferation medium, EP)上,浓度为3.5 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2, 4-dichlorophenoxyacetic acid, 2, 4-D)对于叶片愈伤组织的诱导效果较好,随着2,4-D浓度升高,叶柄的愈伤诱导率反而降低,且褐化也更加严重,说明2,4-D并不利于叶柄愈伤组织的诱导。将诱导的胚性愈伤组织转入红光下的胚胎成熟培养基(embryo maturation medium, EM)中进行体细胞胚诱导后,无扩展子叶的体细胞胚(somatic embryos without expanded cotyledons, SE0)、有一个扩展子叶的体细胞胚(somatic embryos with one expanded cotyledon, SE1)或有两个扩展子叶体细胞胚(somatic embryos with two expanded cotyledons, SE2)这三种类型的体细胞胚都有出现,SE1的类型最多,其愈伤组织鲜重达到了10.6 g。将EM中的成熟体细胞胚转移至芽增殖(shoot proliferation, SP/R)坡面培养基中,当赤霉素(gibberellic acid, GA?)浓度为3.0 mg/L时,SE2能够实现更快速的植株再生,其再生率为45.3%。由此得出结论:外植体类型、植物激素浓度、体细胞胚类型为体胚高效再生过程中的关键因子。
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