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摘要
【目的】为了促进耐盐和香味水稻育种发展，本研究利用CRISPR/Cas9系统对粳稻品种连粳11号的Badh2和OsRR22基因进行编辑，快速获得一批不含有转基因成分且具有耐盐性和香味的纯合水稻材料。解决传统杂交育种中选择年限长、不良连锁等问题。【方法】根据Badh2和OsRR22基因序列中编辑位点的敲除效率设计靶位点，构建pH-Ubi-Cas9-Badh2-OsRR22敲除载体，利用农杆菌介导法转入到受体品种连粳11号中。对转基因后代进行潮霉素和Cas9标记PCR检测以及靶基因测序，获得无外源基因插入的badh2-osrr22纯合株系，并对后代种子性状和苗期耐盐性进行分析。【结果】T_(2)代纯合株系成熟种子中2-AP含量较背景材料连粳11号显著增加，千粒重、粒长、粒宽无明显变化；128mmol/L氯化钠处理14天后株系21-30较连粳11号苗高增加15.2%，苗鲜重增加45.2%，苗干重增加13.2%。【结论】利用CRISPR/Cas9技术对Badh2和OsRR22基因编辑获得能稳定遗传且无外源基因插入的耐盐香味水稻材料，加快了水稻多性状聚合的选育进程。
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