禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立

作者：包红梅; 王秀荣; 刘丽玲; 王昱; 李一经; 陈化兰

来源：中国兽医科学, 2006, (09): 701-706.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2006.09.004

• 禽流感病毒
• 一步法RT-PCR
• 快速诊断 avian influenza virus
• one-step RT-PCR
• diagnoses expeditiousness

为了能快速准确地对禽流感进行病原学诊断,根据流感病毒的M基因序列,在保守区内用Oligo4.0软件设计了1对引物,建立了一步法RT-PCR诊断方法,其目的片段大小为229 bp。通过对不同稀释倍数的H5亚型禽流感病毒尿囊液和棉拭子浸出液进行检测,结果显示,病毒尿囊液的最低检出稀释度为1∶104;阳性棉拭子的最低检出稀释度为1∶23。用病毒分离法和一步法RT-PCR同时检测人工感染鸡不同脏器、口咽及泄殖腔棉拭子样品,二者符合率为100%,但前者的检测灵敏度比后者高10~100倍。用该方法检测H1~H15亚型禽流感病毒和鸡新城疫病毒等其他14种禽病病原,所有禽流感病毒均有229 bp的目的条带出现...

• 单位
  东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所