用于靶向于NFAT的免疫抑制类小分子化合物筛选的细胞模型的建立

作者：肖鹤钱露秦卫松李松沈倍奋黎燕

来源：生物工程学报, 2005, (05): 759-765.

• IL2启动子
• NFATAP1增强子
• 报告基因
• 联合刺激
• FK506阻断
• 初步筛选 IL-2 promoter
• NFAT-AP1 enhancer
• reporter gene
• costimulation
• FK506 inhibition
• preliminary screening

建立IL2启动子以及NFATAP1增强子调控报告基因包括d2EGFP或Luciferase在Jurkat细胞中瞬时表达的细胞模型。首先,利用三步连接将IL2promoter-255～+285处的序列插入到pNFκBd2EGFP表达载体启动子上游,形成3个拷贝的前后串联的增强子序列;然后从人外周血钓取两条IL2promoter序列,包括-326～+46以及-89～+46两段基因组序列,分别替代上述重组表达载体中的TKminimalpromoter,构建所需的IL2promoter以及NFATAP1enhancer调控的报告基因表达质粒:3×NFATAP1IL2Pd2EGFP和3×NFATAP1T...

• 单位
  军事医学科学院毒物药物研究所; 军事医学科学院基础医学研究所