摘要
目的研究细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路对丹参制剂诱导大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)向神经元样细胞分化过程的影响。方法分离、纯化大鼠BMSCs,取第3代细胞进行诱导分化。根据诱导液不同分为空白对照组(A组)、丹参制剂组(B组)及PD98059(ERK1/2特异性抑制剂)组(C组)。对各组细胞进行形态学观察,免疫组织化学方法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白的蛋白表达,PCR检测NSE和巢蛋白的mRNA的表达。结果诱导1 h后,A组细胞形态变化不明显;B组可见细胞形态发生改变,少数细胞呈锥形,细胞突起增多伸长,继续诱导培养5h后细胞突起增多,呈类神经元细胞分化,突起间相互交织;C组细胞总数、类神经元细胞和突起数目均较B组减少。诱导5 h后,B组NSE和巢蛋白染色细胞阳性率和mRNA表达量较A、C组明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论丹参制剂可以促进BMSCs向神经元样细胞分化,ERK 1/2的特异性抑制剂PD98059能够拮抗丹参制剂促分化作用,提示ERK1/2信号通路可能参与了丹参制剂诱导BMSCs向神经元样细胞分化的过程。
- 单位