mTOR活化对抗β2GPI抗体/β2GPI复合物诱导THP-1细胞组织因子表达的影响

作者：夏龙飞; 巨红妹; 周红; 王婷

来源：临床检验杂志, 2017, 35(03): 215-220.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2017.03.17

• 抗磷脂综合征
• 雷帕霉素靶蛋白
• 抗β2GPI抗体/β2GPI复合物
• 组织因子
• 雷帕霉素

目的探讨雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在抗β2糖蛋白I(β2GPI)/β2GPI复合物诱导THP-1细胞组织因子(TF)表达中的作用。方法用抗β2GPI抗体/β2GPI和β2GPI/Ig G-APS处理THP-1细胞,mTOR抑制剂雷帕霉素(100 nmol/L)进行干预实验;收集细胞总RNA和蛋白质,实时定量PCR(RT-q PCR)和TF活性试剂盒分别检测THP-1细胞中TF mRNA表达水平及其活性,western blot检测THP-1细胞中mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)、p38、p-p38、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK、NF-κB p65和p-NF-κB p65的表达情况。结果抗β2GPI抗体/β2GPI和β2GPI/Ig G-APS复合物均能明显增加THP-1细胞TF mRNA和TF活性以及mTOR磷酸化水平(P均<0.05);雷帕霉素能明显降低抗β2GPI抗体/β2GPI和β2GPI/Ig G-APS诱导THP-1细胞TF的表达水平以及mTOR磷酸化的效应(P均<0.05),也能明显地削弱p38、ERK1/2和NF-κB p65的磷酸化水平(P均<0.05),而对JNK的磷酸化水平无抑制效应(P>0.05)。结论抗β2GPI抗体/β2GPI复合物能够刺激THP-1细胞mTOR的活化,并能影响TF的表达。

• 单位
  江苏大学; 河北医科大学第四医院