绵羊EGFR基因的克隆、表达及序列分析

作者：沈继源; 王继卿^*; 郝志云; 罗玉柱; 胡江; 刘秀; 李少斌; 赵孟丽; 王建清; 孙凯

来源：基因组学与应用生物学, 2021, 40(04): 1463-1470.

DOI：10.13417/j.gab.040.001463

• EGFR基因
• 克隆
• 绵羊
• 乳腺
• 组织表达

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)是酪氨酸激酶受体家族成员之一,不仅参与细胞增殖、生长和凋亡等多种生命活动,也可调节哺乳动物的乳腺发育及泌乳维持,但对绵羊EGFR基因的序列特征及组织表达情况鲜有报道。本试验以高泌乳量的小尾寒羊(泌乳高峰期和空怀期)及低泌乳量的甘肃高山细毛羊(泌乳高峰期)母羊为研究对象,利用RT-PCR、克隆及测序技术获得绵羊EGFR基因完整的CDS区,分析了EGFR蛋白的结构特征及理化性质,利用RT-qPCR技术研究了基因的组织表达情况。结果表明,绵羊EGFR基因CDS区全长为3 627 bp,编码1 208个氨基酸。绵羊EGFR的氨基酸序列在各物种间较保守,与黄牛EGFR的氨基酸序列同源性最高。EGFR为跨膜蛋白,包含111个磷酸化位点,二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主。网络互作分析表明EGFR蛋白与肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)、表皮调节素(EREG)、双调蛋白(AREG)及生长因子受体结合蛋白2 (GRB2)结合发挥作用。EGFR主要参与MAPK,PI3K/AKT,JAK/STAT及Wnt信号通路,从而参与了动物的乳腺发育及泌乳功能的调节。RT-qPCR结果表明,绵羊EGFR基因的表达具有组织特异性、时空特异性和品种特异性。该基因在所研究的8个组织中均表达,但在肾脏、卵巢、肝脏、乳腺和肺脏组织中的表达量较高;在小尾寒羊的乳腺组织中,该基因在空怀期的表达量显著高于泌乳高峰期的(P<0.05);在泌乳高峰期的乳腺组织中,该基因在小尾寒羊中的表达量高于甘肃高山细毛羊的。本试验为深入研究绵羊EGFR基因的泌乳生物学功能提供了基础数据。

• 单位
  甘肃农业大学