小麦TaTCTP蛋白的原核表达及抗体制备

作者：麻楠; 孙天杰; 刘超; 焦园园; 王冬梅^*

来源：河北农业大学学报, 2020, 43(04): 10-29.

DOI：10.13320/j.cnki.jauh.2020.0066

• 小麦
• TCTP
• 原核表达
• 多克隆抗体
• Western blotting

为了阐明翻译控制肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein, TCTP)在小麦-叶锈菌互作中的作用及其机制,本研究克隆了TaTCTP的开放阅读框(ORF)全长,并经过原核表达、亲和纯化、动物免疫,制备了TaTCTP兔多克隆抗体。结果表明,该基因CDS区全长为507 bp,编码168个氨基酸,预期分子量为18.8 kD,并具有较高的可溶性。以纯化后的TaTCTP重组蛋白制备的抗体可以特异性识别TaTCTP,效价为1∶6 400。Western blotting检测发现TaTCTP在叶锈菌侵染后受诱导上调。本研究为进一步研究TaTCTP在小麦与叶锈菌互作过程中的功能及其作用机制奠定了基础。

• 单位
  河北农业大学; 生命科学学院