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摘要
本试验旨在揭示桑叶多糖（MLP）对免疫抑制小鼠肠道损伤和微生物多样性的调节作用，初步阐明其作用机制。选择体重（20.0±0.5） g的5周龄雄性BALB/c小鼠60只，随机分为正常对照组（NC组）、环磷酰胺模型组（MC组）、桑叶多糖低剂量组（MLPL组）、桑叶多糖中剂量组（MLPM组）、桑叶多糖高剂量组（MLPH组）和药物对照组（LM组），每组10只小鼠。各组小鼠腹腔注射80 mg/kg BW环磷酰胺（除NC组外），每天1次，连续3 d，以诱导免疫抑制。第4天开始MLPL、MLPM、MLPH和LM组小鼠每天分别灌胃20、40、80 mg/kg BW的MLP和40 mg/kg BW的左旋咪唑，连续给药9 d;NC和MC组小鼠每天灌胃等量饮用水。试验期13 d。采用苏木精-伊红（HE）染色法、定量逆转录PCR(RT-qPCR)法、微生物扩增子法分别测定各组小鼠空肠组织形态学，结肠上皮紧密连接蛋白[闭合蛋白（Occludin）、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、封闭蛋白-5(Claudin-5)]、黏液素2(MUC2)、免疫相关因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)]、免疫信号通路相关蛋白[Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB p65亚基（p65）]的mRNA表达以及盲肠微生物多样性。结果表明：1）与MC组比较，MLPL、MLPM和MLPH组小鼠空肠病理损伤明显减轻。2）与NC组相比，MC组Claudin-5、ZO-1、Occludin、MUC2的mRNA相对表达量显著降低（P<0.05）。与MC组相比，MLPM、MLPH和LM组Claudin-5、MUC2的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）,MLPM和MLPH组Occludin的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）,MLPH组ZO-1的mRNA相对表达量显著升高（P <0.05）。3）与NC组相比，MC组TNF-α、IL-1β的mRNA相对表达量显著降低（P<0.05）,IL-10、TGF-β的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）。与MC组相比，MLPM、MLPH和LM组TNF-α、IL-1β的mRNA相对表达量升高（P<0.05）,MLPL、MLPM、MLPH和LM组IL-10和TGF-β的mRNA相对表达量显著降低（P<0.05）。4）与NC组相比，MC组TLR4、MyD88、p65的mRNA相对表达量显著降低（P <0.05）。与MC组相比，MLPM、MLPH和LM组TLR4、MyD88、p65的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）。5）与NC组相比，MC组拟杆菌门的相对丰度显著降低（P<0.05）；与MC组比较，MLPH组拟杆菌门的相对丰度显著增加（P<0.05）。与NC组相比，MC组免疫抑制相关菌如丁酸弧菌属（Butyricimonas）和真杆菌属（Eubacterium）的相对丰度显著增加（P <0.05），而MLPL、MLPM、MLPH组丁酸弧菌属和真杆菌属的相对丰度显著降低（P <0.05）。由此可见，MLP可通过修复肠道屏障功能、调节免疫细胞因子、改变肠道微生物群落的空间结构来调节免疫应答，拮抗免疫抑制，其调控机制可能与TLR4/MyD88/p65信号通路的激活有关。
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单位江苏农牧科技职业学院
