摘要
为制备及鉴定十氯酮(Chlordecone)的抗体,利用羰基二咪唑(CDI)法将十氯酮还原产物与血蓝蛋白(KLH)及牛血清白蛋白(BSA)的氨基偶联,制备出人工免疫原CD-KLH和人工检测抗原CDBSA,并采用傅里叶红外光谱对人工抗原进行鉴定。用CD-KLH以腹腔皮下多点免疫注射的方式免疫BALB/c小鼠,断尾采血制备鼠源多克隆抗体血清。ELISA测定血清效价,间接竞争ELISA测定血清敏感性及特异性。结果显示,十氯酮鼠源多克隆抗体效价达10 000。确定了ELISA方法包被抗原与十氯酮抗体的最佳质量浓度分别为10μg/mL和25μg/mL,十氯酮间接竞争ELISA试验结果表明,十氯酮最佳线性检测限为2.5μg/mL~40μg/mL,最低检测限达0.625μg/mL,与BSA、KLH交叉反应率均小于0.01%,低于常规气相色谱-电子捕获检测方法的检出限。
- 单位