Eftud2对星形胶质细胞炎症的作用研究

作者：裴洁; 李灏; 付文亮; 徐东刚^*

来源：解放军医学院学报, 2023, 1-8.

• 创伤性脑损伤
• 延长因子Tu GTP结合域蛋白2
• 免疫炎症
• 星形胶质细胞
• 髓样分化因子88

背景 创伤性脑损伤后异常激活的神经炎症是预后不良的主要原因之一，星形胶质细胞在炎症发展中具有促进修复或加重损伤的双重作用。延长因子Tu GTP结合域蛋白2(elongation factor Tu GTP binding domain containing protein,Eftud2)是免疫调节因子，在炎症和肿瘤的发生发展中均具重要作用。目的 观察Eftud2对星形胶质细胞炎症的影响。方法小鼠随机分为假手术组和创伤性脑损伤组，使用经典控制性皮层撞击装置构建创伤性脑损伤模型。免疫荧光观察损伤前后S100β和Eftud2含量变化。转棒和平衡木实验评估小鼠造模前后运动功能的改变。实时荧光定量PCR检测损伤前后组织中IL-1β、TNF-α、NLRP3在转录水平的变化。使用小干扰RNA敲低MA细胞中的Eftud2，而后使用脂多糖刺激星形胶质细胞系(MA细胞系)模拟炎性状态，实时荧光定量PCR检测MA细胞中IL-6、IL-1β、TNF-α、GM-CSF、CXCL-10、IL-10、髓样分化因子88(myeloiddifferentiationfactor88, MyD88)转录水平变化，蛋白质免疫印迹检测MA细胞中Eftud2、MyD88蛋白表达量变化。结果 动物实验中，与假手术组相比，创伤性脑损伤组小鼠损伤部位Eftud2和S100β荧光强度增加(P<0.01)，损伤组织周围炎性因子IL-1β、TNF-α、NLRP3转录水平上升(P<0.01)。细胞实验中，用脂多糖刺激后，MA细胞中Eftud2蛋白表达水平上调(P<0.05)，同时Eftud2转录水平以及单细胞荧光强度也上升(P<0.01)。给予小干扰RNA后，敲低组MA细胞中Eftud2蛋白表达水平、转录水平及单细胞荧光强度都明显下降(P<0.01)。敲低MA细胞中的Eftud2并给予脂多糖刺激后，实时荧光定量PCR结果显示，IL-6转录水平下降(P<0.05), IL-1β、 TNF-α、 GM-CSF、MyD88和CXCL-10转录水平也下降(P<0.01)，同时抗炎因子IL-10转录水平上升(P<0.05)。蛋白免疫印迹结果显示，MyD88蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论 Eftud2可能通过MyD88介导的信号通路调控星形胶质细胞的炎症反应，其作用机制有待于进一步研究。

• 单位
  安徽医科大学; 基础医学院