诱导肝细胞L02和肝癌细胞MHCC97L产生的氧化应激与Yes相关蛋白的关系

作者：Qiao Xin; Li Hua; Wu Xiaocai; Zhu Shuguang; Yang Yang; Chen Guihua

来源：中华实验外科杂志, 2015, 32(08): 1876-1878.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.08.037

• 过氧化氢
• 氧化应激
• Yes相关蛋白
• 细胞周期

目的通过过氧化氢诱导肝细胞及肝癌细胞产生氧化应激,探讨氧化应激与Hippo信号通路中核心蛋白Yes相关蛋白(YAP)的相关性。方法利用过氧化氢诱导构建氧化应激模型,用200μmol/L过氧化氢作用于正常人肝细胞L02与肝癌细胞MHCC97L 6 h,Western blot检测YAP蛋白表达的差异,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测YAP基因mRNA表达差异,流式细胞术检测L02细胞周期的变化,比较实验组和对照组差异。结果 200μmol/L的过氧化氢作用于L02细胞及MHCC97L细胞6 h后,与对照组比较,实验组两种细胞YAP蛋白表达明显升高。L02细胞中YAP基因mRNA表达水平上调479.5%,差异有统计学意义(P<0.01),MHCC97L细胞上调4.7%,差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞术检测细胞周期,L02细胞实验组与对照组比较S期细胞比例显著升高[(46.40±4.88)%比(28.61±1.01)%],差异有统计学意义(P<0.01),G1期[(45.21±9.45)%比(59.59±2.44)%和G2期(8.42±5.14)%比(11.70±3.35)%]细胞分布改变不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在氧化应激状态的L02细胞及MHCC97L细胞中,Hippo信号通路存在调控紊乱,核心蛋白YAP表达上调。其中L02细胞存在转录水平的调控机制,MHCC97L细胞存在转录后水平的调控机制。氧化应激可以促进L02细胞增殖,YAP蛋白的表达升高可能是其中的原因之一。

• 单位
  中山大学; 中山大学附属第三医院