骨桥蛋白靶向磁性纳米探针对动脉斑块的分子成像

作者：乔红玉; 王亚斌; 高磊; 徐斌; 江振华; 梁潇; 田捷; 曹丰

来源：中华老年多器官疾病杂志, 2016, 15(4): 283-288.

DOI：10.11915/j.issn.1671-5403.2016.04.067

• 动脉粥样硬化斑块
• 纳米颗粒
• 骨桥蛋白
• 分子影像

目的：通过构建新型骨桥蛋白（OPN）靶向的四氧化三铁（Fe3O4）纳米颗粒，实现对动脉粥样硬化斑块中平滑肌增殖的荧光成像。方法通过?COOH和?NH2之间的脱水缩合反应将OPN抗体偶联至DMSA修饰的Fe3O4纳米颗粒表面，进而将荧光染料NHS-Cy5.5连接获得纳米成像探针。通过噻唑蓝（MTT）和TUNEL方法检测探针对巨噬细胞的毒性。动脉粥样硬化动物模型通过高脂喂养ApoE?/?小鼠20周构建成功，继而将探针（5mg Fe/kg）经小鼠尾静脉注射，24h后用小动物活体成像仪系统进行光学三维成像，离体血管的冰冻切片做Cy5.5的激光共聚焦检测。结果 MTT结果显示，加不同浓度探针孵育：0，5，10，15，20，25，30mg/L相较于对照组来说，细胞活性并未表现出差异[A490nm：（1.10±0.03），（1.05±0.03），（1.03±0.02），（0.96±0.02），（0.96±0.03），（0.93±0.03） vs （1.11±0.05）， P＞0.05]；TUNEL结果显示，加不同浓度的探针孵育：0，10，20，25，30mg/L与对照组比较来说，细胞凋亡率差异无统计学意义[（21.2±1.5）%，（21.8±1.1）%，（21.5±1.2）%，（22.3±1.2）%vs （20.5±1.0）%，P＞0.05]，证实探针在我们所运用浓度范围内对细胞几乎是无毒性的。探针经尾静脉注射到动脉粥样硬化模型小鼠体内后，24h光学成像可见颈部有明显的信号，且组织切片的激光共聚焦结果显示，探针主要集中在斑块内，HE染色结果进一步显示斑块的性质。结论本实验所构建的探针在所使用浓度范围内基本无任何明显毒性，且对动物颈部动脉粥样硬化斑块有较好的识别效果。

• 单位
  第四军医大学; 中国科学院自动化研究所; 西京医院; 解放军总医院