猪水泡病病毒HK/70株全长cDNA分子克隆感染性的鉴定

作者：郑海学; 刘湘涛; 尚佑军; 吴锦艳; 白兴文; 靳野; 孙世琪; 冯霞; 田宏; 郭慧琛; 郭建宏; 刘在新; 常惠芸; 马军武; 谢庆阁

来源：科学通报, 2006, (16): 1900-1905.

• 猪水泡病病毒
• 全长cDNA
• 感染性克隆
• 体外转录本
• 反向遗传学

为了鉴定猪水泡病病毒(SVDV)HK/70株的全长cDNA分子的感染性,以所构建的SVDVHK/70株的全长cDNA分子为模板,应用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,将获得的RNA用脂质体转染法导入IBRS-2细胞,传代培养,观察到典型的SVDV致细胞病变效应.反向血凝鉴定、间接免疫荧光、RT-PCR及序列测定结果表明,从猪水泡病病毒全长cDNA拯救出了猪水泡病病毒(pSVDV).用电子显微镜观察了pSVDV的形态,测定了pSVDV的TCID50和LD50,并与亲本毒进行了比较,结果显示,pSVDV与亲本毒的毒力差别不显著.结果表明,猪SVDVHK/70的感染性cDNA克隆已经成功构建,为进...

• 单位
  西北农林科技大学; 农业部; 动物科技学院; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 中国农业科学院研究生院