没食子酸与牛血红蛋白相互作用的研究

作者：施沈佳; 李剑瑛; 黎中宝^*; 陈俊德^*; 吴坤远

来源：生物技术进展, 2019, 9(01): 54-61.

DOI：10.19586/j.2095-2341.2018.0103

• 没食子酸
• 牛血红蛋白
• 相互作用
• 光谱测定

牛血红蛋白(bovine hemoglobin,BHb)与人血红蛋白高度同源,且易获得,常用于血红蛋白与小分子化合物结合的研究。没食子酸(gallic acid,GA)作为一种多酚类小分子化合物,可被用作小分子药物模型,研究其与BHb的相互作用,可为其在医药领域的应用提供理论依据。运用紫外-可见光谱(UV-vis spectroscopy)、荧光光谱(fluorescence spectroscopy)、傅里叶变换红外(Fourier transform infrared,FTIR)光谱、圆二色光谱(circular dichroism,CD)等手段,在pH 7.0条件下,研究GA与BHb的相互作用。紫外-可见光谱的结果表明,GA对BHb的氧合状态没有影响,不会使氧合血红蛋白脱氧。结合荧光光谱和相关公式计算结果可知,GA与BHb相互作用发生了荧光猝灭,且猝灭常数随着温度的升高而增大,说明GA与BHb相互作用的猝灭类型为动态猝灭;通过计算得到了不同温度下GA与BHb相互作用的结合常数,分别为Ka298=7.941×103L/mol,Ka308=10.478×103L/mol; GA与BHb之间主要靠疏水作用力结合,可自发发生反应;色氨酸和酪氨酸残基所处微环境受到扰动,色氨酸残基的荧光吸收峰强度比酪氨酸残基变化大,表明GA与BHb分子的结合位点更接近于色氨酸残基。FTIR光谱和CD的检测结果显示,与GA作用前后,BHb均以α-螺旋结构为主,即GA对BHb分子的二级结构影响较小。

• 单位
  集美大学; 福建农林大学; 国家海洋局第三海洋研究所