MicroRNA-381靶向调控KLF-4抗肾纤维化的机制研究

作者：王立成; 李现铎; 陈冬冬; 唐冠宝; 门同义^*

来源：中国现代医学杂志, 2020, 30(16): 1-6.

• 肾病
• 纤维化
• microRNA
• 诊断
• 治疗

目的探究MicroRNA-381(miR-381)通过靶向调控KLF-4抑制肾纤维化病理进程的作用机制。方法选取2014年2月—2017年12月山东大学附属千佛山医院收治的106例肾纤维化患者;另取同期该院健康体检者100例作为对照组。采用microRNA(miRNA)靶基因数据库筛选出miR-381潜在靶基因KLF-4并使用荧光素酶进行验证;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾纤维化患者血清miR-381。将NRK49F细胞分为miR-381组、NC组、AngⅡ组及空白组。使用qRT-PCR和Western blotting检测miR-381组、NC组中KLF-4表达变化;使用qRT-PCR检测miR-381组和NC组中多种肾纤维化因子mRNA表达变化。检测AngⅡ组和空白组细胞中miR-381表达变化,miR-381组、NC组及AngⅡ组细胞中α-SMA表达变化。将小鼠随机分为单侧输卵管梗阻(UUO)组、UUO+miR-381组及假手术组,检测UUO组和假手术组小鼠肾脏组织miR-381表达变化,并使用Masson染色观察miR-381对肾纤维化的作用。结果 qRT-PCR结果显示,肾纤维化患者血清miR-381相对表达量低于对照组(P?<0.05)。相比NC组,miR-381组肾纤维化因子α-SMA、CTGF、COL1A1及COL3A1 mRNA相对表达量降低(P?<0.05);AngⅡ刺激NRK49F细胞后,相比空白组miR-381相对表达量降低,而AngⅡ组α-SMA相对表达量升高,过表达miR-381后α-SMA相对表达量降低(P?<0.05)。KLF-4是miR-381靶基因,miR-381可以负调控KLF-4 mRNA和蛋白的表达(P?<0.05)。UUO组小鼠肾脏组织中miR-381相对表达量低于假手术组,相比UUO组,UUO+miR-381组肾纤维化区域减小,细胞外基质沉积变少,COL1A1和COL3A1 mRNA相对表达量降低(P?<0.05)。结论 miR-381通过抑制KLF-4抗肾纤维化的发展进程,可能成为肾纤维化诊断及治疗的新靶点。

• 单位
  山东大学; 山东省千佛山医院