miR-1827抑制肺腺癌A549细胞系迁移并调控c-Myc表达的研究

作者：邓见青; 初向阳^*

来源：解放军医学院学报, 2019, 40(02): 172-177.

• 肺腺癌A549细胞系
• 微小RNA
• 原癌基因c-Myc

目的探讨miR-1827对肺腺癌A549细胞细胞系迁移功能的影响以及对原癌基因c-Myc是否有调控作用。方法采用生物信息学方法对miR-1827与c-MYC基因mRNA 3’非翻译区(untranslated region,UTR)靶向配对关系进行预测。使用脂质体瞬时转染的方法将miR-1827类似物导入A549肺癌细胞系,使A549过表达miR-1827。Real-Time PCR验证转染后miR-1827以及c-Myc mRNA的表达量。Western blot法检测c-Myc蛋白表达量的变化。细胞划痕实验及Transwell细胞迁移实验检验miR-1827对A549迁移功能的影响。以上均以转染miR-NC序列的A549细胞作为对照。使用双萤光素酶报告基因实验对miR-1827与c-Myc是否存在直接调控关系及具体结合部位进行鉴定。使用GEO数据库的公开芯片数据对miR-1827与肺癌患者的预后之间的关系进行探索。结果在线生物信息学网站Targetscan以及DIANA-LAB显示miR-1827种子序列与c-Myc mRNA 3’UTR区存在完全配对序列。与对照组相比,miR-1827转染组miR-1827表达量显著上调,c-Myc基因mRNA以及蛋白水平均明显下降。双萤光素酶报告基因实验提示miR-1827直接通过与c-Myc mRNA 3’UTR配对结合下调c-Myc的表达。miR-1827可以显著抑制A549的迁移功能。芯片GSE63805显示miR-1827高表达组8年总生存率为56.25%,显著优于miR-1827低表达组的12.5%。结论 miR-1827能调控原癌基因c-Myc的表达并抑制A549细胞迁移。