摘要

为建立稳定的防风毛状根遗传转化体系,本研究利用含有表达载体pCAMBIA2301的K599农杆菌侵染防风无菌苗叶片10min,转入MS固体培养基共培养3d,转接到含有50mg/L Cef的固体MS培养基中除菌培养诱导,通过PCR检测获得防风毛状根,并对影响防风毛状根生长的液体培养基进行筛选,利用HPLC法检测防风毛状根的质量。结果表明,1/2MS液体培养基中生长的毛状根生物量及4种色原酮含量均比MS、B5两种培养基中生长的毛状根高,在生物量上分别为MS、B5的1.25倍和2.24倍,色原酮含量为MS、B5的2.05倍和1.66倍,从而明确在这3种培养基中,1/2MS液体培养基为最适合防风毛状根生长的培养基。对诱导出的3个株系进行比较,分别测定其生物量及四种色原酮的含量,其中ZB株系的色原酮含量最高分别为ZA、ZC的1.03倍和1.99倍。ZC株系的生物量最高,分别为ZA、ZB的2.06倍和1.99倍。本研究初步建立防风毛状根遗传转化体系,为后续实验中探究防风毛状根功能性基因奠定了基础。